Le Centre national de la recherche scientifique est un organisme public de recherche pluridisciplinaire placé sous la tutelle du ministère de l’Enseignement supérieure et de la Recherche. Créé en 1939 et dirigé par des scientifiques, il a pour mission de faire progresser la connaissance et être utile à la société dans le respect des règles d’éthique, de déontologie et d’intégrité scientifique.

Missions :
Sous la responsabilité conjointe du Dr. François Foulquier et du Dr. Ninon Very, vous participerez activement au développement de ce projet à travers les missions suivantes :
• Techniques de biologie cellulaire : assurer la culture, la conservation et l’entretien des lignées cellulaires (modèles knock-out) et des fibroblastes issus de patients CDG, réaliser des transfections (transitoires ou stables), ainsi que des analyses du glycoprotéome en microscopie confocale en fluorescence
• Techniques de biochimie fonctionnelle et structurale : analyser les glycanes et les glycoprotéines par des approches complémentaires de biochimie (Western-blot, lectin-blot, cytométrie en flux, RTqPCR), de glycomique classique (spectrométrie de masse) et de marquage métabolique à l’aide de précurseurs non naturels de sucres, couplé à des approches de chimie-click
• Approches thérapeutiques : contribuer à la mise au point d’une approche thérapeutique pour les CDG associés à des perturbations du transport de protons, notamment par supplémentation en manganèse

Activités :
1. Biologie cellulaire (Env. 30% du temps)
• Gestion quotidienne des lignées cellulaires et des fibroblastes de patients : mise en culture, comptage, congélation et décongélation
• Préparation des milieux de culture et des réactifs nécessaires aux expériences, dans le respect des règles de stérilité et d’utilisation du PSM de type L2
• Ensemencement et traitement des cellules (traitements pharmacologiques, transfection de plasmides, précurseurs de sucres non naturels)
• Préparation des échantillons biologiques pour les différentes analyses expérimentales

2. Imagerie cellulaire et cytométrie en flux (Env. 20% du temps)
• Fixation et marquage des cellules à l’aide d’anticorps et de lectines pour les analyses en microscopie et en cytométrie en flux
• Acquisition et analyse informatique des images obtenues en microscopie confocale et en fluorescence, ainsi que des données issues de la cytométrie en flux via les logiciels dédiés

3. Biochimie et glycomique (Env. 20% du temps)
• Analyse des glycanes et glycoprotéines par Western-blot, lectinographie et analyse de l’expression génique par RT-qPCR
• Acquisition, traitement et analyse statistique des données expérimentales
• Préparation des échantillons destinés aux analyses de spectrométrie de masse et aux approches de marquage métabolique

4. Évaluation des approches thérapeutiques (Env. 15% du temps)
• Mise en œuvre des protocoles expérimentaux permettant d’évaluer l’effet de traitements sur les phénotypes cellulaires et les défauts de glycosylation
• Suivi et comparaison des résultats obtenus dans les différentes conditions expérimentales
• Contribution à l’optimisation des conditions de traitement à visée thérapeutique

5. Vie du laboratoire & Traçabilité (Env. 15% du temps)
• Planification et organisation des expériences selon les protocoles établis
• Traçabilité rigoureuse des échantillons
Voir plus sur le site emploi.cnrs.fr...

Le Centre national de la recherche scientifique est l’une des plus importantes institutions publiques au monde : 34 000 femmes et hommes (plus de 1 000 laboratoires et 200 métiers), en partenariat avec les universités et les grandes écoles, y font progresser les connaissances en explorant le vivant, la matière, l’Univers et le fonctionnement des sociétés humaines. Depuis plus de 80 ans, y sont développées des recherches pluri et interdisciplinaires sur tout le territoire national, en Europe et à l’international. Le lien étroit que le CNRS tisse entre ses missions de recherche et le transfert vers la société fait de lui un acteur clé de l’innovation en France et dans le monde. Le partenariat qui le lie avec les entreprises est le socle de sa politique de valorisation et les start-ups issues de ses laboratoires (près de 100 chaque année) témoignent du potentiel économique de ses travaux de recherche.

Competences :
Compétences techniques indispensables :
• Connaissances scientifiques générales : solides connaissances générales en biologie et maîtrise théorique et pratique des bases de biologie cellulaire et de biochimie. Des connaissances en glycobiologie constitueraient un réel atout
• Biologie cellulaire : maîtrise des principales techniques de biologie cellulaire, des règles d’asepsie et de travail sous PSM L2
• Biochimie : maîtrise des techniques de Western blot, de cytométrie en flux et de RT-qPCR. Une familiarité avec les approches d’analyse des glycoprotéines et des glycoconjugués (lectinographie, spectrométrie de masse, marquage métabolique) serait un plus
• Anglais scientifique : bonne maîtrise de l’anglais scientifique (lecture et rédaction de protocoles et documents scientifiques)
• Veille et restitution : capacité à rechercher, synthétiser l’information scientifique (veille de la littérature) et à restituer clairement ses résultats lors des réunions d’équipe

Qualités professionnelles :
• Rigueur et fiabilité : soin et précision dans l’exécution des protocoles expérimentaux, respect des procédures et fiabilité dans la réalisation et le suivi des expériences
• Curiosité scientifique : intérêt pour la compréhension des mécanismes biologiques et démarche proactive pour approfondir les connaissances nécessaires au projet
• Proactivité et esprit d'initiative : Force de proposition dans la planification, l’organisation et l'anticipation du calendrier expérimental, ainsi que dans la mise en œuvre de nouvelles approches ou expériences nécessaires à l’avancement du projet
• Autonomie et esprit d’équipe : capacité à mener ses tâches quotidiennes de manière autonome à la paillasse, tout en s’intégrant activement, de manière collaborative et constructive, au sein de l’équipe de recherche et du laboratoire
• Motivation et dynamisme : implication, assiduité et volonté de s’investir pleinement dans les différentes activités du projet
• Adaptabilité et créativité : capacité à s’adapter aux contraintes expérimentales, à proposer des solutions et à contribuer à l’optimisation et au développement de nouvelles approches expérimentales

Contraintes et risques :